材料與方法

大容量多孔離心機(jī)（LXJ-ⅡB）：上海安亭科學(xué)儀 器廠；壓力蒸汽滅菌鍋（LS-3D）、生化培養(yǎng)箱（SPX250B-Z）、振蕩培養(yǎng)箱（SPX-250B-D）：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司；高效液相色譜（1200）：美國 Agilent；pH 計(jì) （pH-3C）：上海佑科儀器儀表有限公司；雙人凈化工作 臺(tái)（SW-CJ-2D）：浙江蘇凈凈化設(shè)備有限公司；生物顯 微鏡（DM1000）：德國 LEICA；電泳儀（DYY-11）：北京 市六一儀器廠；PCR 儀 （2720）、DNA 測 序 儀（3730 XL）：美國 ABI。?。?±0.2）g 土壤裝入錐形瓶，加入 100 mL 無菌生 理鹽水。錐形瓶中加入玻璃珠后放入搖床振蕩 20 min， 待靜置分層后取上清液涂于固體培養(yǎng)基，于 28 ℃恒溫 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 3 d 后，取長勢(shì)較好的幾株菌落再次平板 劃線培養(yǎng)，將菌株進(jìn)行純化，最后進(jìn)行斜面保存與甘 油保存。

結(jié)論

從山葡萄生長的土壤中篩選得到 8 株具有降解有 機(jī)酸效果的菌株，篩選出一株降酸效果最佳的菌株 S4，對(duì)于酒石酸、蘋果酸、檸檬酸降解率分別為（71.90± 0.27）%、（86.33±0.53）%、（72.77±0.46）%。經(jīng)多次傳代 后，其降酸率下降，但可穩(wěn)定在酒石酸降解率為 （20.13±0.27）%，蘋果酸降解率為（18.38±0.92）%，檸 檬酸降解率為（11.85±0.55）%。通過形態(tài)及分子生物 學(xué)鑒定該菌株為草酸青霉（Penicillium oxalicum）。該菌 株最適接種量為 3 %，最適生長溫度為 28 ℃，最適生 長 pH 值為 3.0，最適生長轉(zhuǎn)速為 150 r/min。其對(duì) SO2 耐受性 > 質(zhì)量濃度 500 mg/L，對(duì)酒精耐受性 > 體積分 數(shù) 12 %，致死溫度為 60℃~65 ℃，20 min ~30 min。