雪膽(Hemsleya sinesis Cogn)為葫蘆科雪膽屬 植物,其有效部分為塊根。其提取物具有抗腫瘤、廣 譜抗菌、抗病毒、抗炎鎮(zhèn)咳、抗肝炎等作用。 為驗(yàn)證雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌的防治效果作 用,根 據(jù)中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告——獸 用 中 藥 、天 然藥物臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則(第 1596 號(hào))中臨 床擴(kuò)大試驗(yàn)要求,對(duì)雪膽口服液的臨床療效驗(yàn)證, 選擇某養(yǎng)殖場(chǎng)飼養(yǎng)的海蘭白殼蛋雞大腸桿菌病自 然病例作為研究對(duì)象, 應(yīng)用雪膽口服液按 4mL/L 飲水添加,連續(xù)飲用 5d,觀察防治效果。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
海蘭白殼蛋雞 1400 只,按常規(guī)免 疫 程 序 免 疫 疫 苗,養(yǎng) 至 42 日 齡 時(shí),雞 只 表 現(xiàn) 精 神 萎 靡,羽 毛 逆 立,扎 堆,食 欲 廢 絕,腹 瀉,糞 便 呈 黃 綠色水便,初步懷疑大腸桿菌病。
1.2 病例診斷和分組
對(duì) 上 述 雞 群,選 擇 癥 狀 典 型病例,進(jìn)行剖檢和細(xì)菌分離、生化鑒定。 將 1400 只隨機(jī)分為中藥組及對(duì)照組兩組,每 組約 700 只,兩組給予同樣的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件。 Ⅰ組 為中藥組, 給予濃度為推薦劑量的雪膽口服液自由飲水, 連續(xù)給藥 5d; Ⅱ組為硫酸新霉素可溶性 粉 組 , 按 推 薦 劑 量 (0.5g/L) 飲 水 給 藥 , 連 續(xù) 給 藥 5d,每天觀察并記錄雞只的精神狀況。 分組及給藥 情況見(jiàn)表 1。
1.3 試驗(yàn)藥物與化學(xué)試劑
雪 膽 口 服 液,德 州 神 牛藥業(yè)有限公司中試生 產(chǎn),批 號(hào):20160412。 硫 酸 新霉素可溶性粉,購(gòu)于河南森隆獸藥有限公司,批 號(hào):20160826;麥 康 凱 瓊 脂、營(yíng) 養(yǎng) 瓊 脂、細(xì) 菌 微 量 生 化反應(yīng)管,購(gòu)于杭州天和微生物試劑有限公司;營(yíng) 養(yǎng)肉湯,購(gòu)于北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠。
1.4 試驗(yàn)儀器
電熱鼓風(fēng)干燥箱,北 京 市 永 光 明 醫(yī) 療 儀 器 廠 ;生化培養(yǎng)箱(博迅SPX-250B-Z),上 海 博 迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè) 備 廠 ; 恒溫培養(yǎng)振蕩器 (ZHWY-103D), 上海智城分析儀器 制造有限公 司;電子天平(MR200A),上海第二天平儀器廠;超 凈工作臺(tái)(LGJ-10),北京四環(huán)科學(xué)儀器廠。 TGL16 高速臺(tái)式電動(dòng)離心機(jī), 金壇市杰瑞爾電器有限公司。
1.5 檢測(cè)指標(biāo)
每天觀察記錄試驗(yàn)雞的臨床癥 狀變化、死亡、增 重情況,計(jì)算各組的保護(hù)率、治愈 率、死亡率(統(tǒng)計(jì)方法同試驗(yàn)性臨床試驗(yàn))。
1.6 數(shù)據(jù)分析
對(duì)采用 SPSS 17 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù) 進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),死 亡 率、保 護(hù) 率、治 愈 率 采 用 卡 方 x2 檢驗(yàn)。 兩組的 X2 檢驗(yàn): X2 = (ad-bc)2 n/(a+ b) (c+d) (a+c) (b+d),其 中 I 組 存 活 數(shù) a,死 亡 數(shù) c;II 組存活數(shù) b,死亡數(shù) d。 n 為兩組動(dòng)物總數(shù)。 X2 >6.63 為差異顯著,X2 <3.84 表示差異不顯著。
2 結(jié)果與分析
2.1 病例診斷
2.1.1 剖檢變化
對(duì)典型病例進(jìn)行剖 檢, 可 見(jiàn) 到 大腸桿菌病的病理變化:肌 肉 脫 水,顏 色 暗 紅;肝 臟腫脹, 有散在 的出血點(diǎn), 部分雞有輕微的心包 炎、肝周炎表現(xiàn)。
2.1.2 細(xì)菌分離、 鑒定
從病死雞的肝 臟 采 集 病 料,接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,培 養(yǎng) 24h 后,可 見(jiàn) 紅色菌落。 挑取單個(gè)菌落,接種肉湯增菌后,進(jìn)行 生化試驗(yàn), 生化鑒定結(jié)果符合大腸桿菌的生物學(xué) 特征。
2.2 防治效果
觀察兩種藥物對(duì)大腸桿菌病雞的防治效果 , 新霉素組用藥第 2 天后癥狀明顯好轉(zhuǎn),腹瀉停止, 飲食欲有所恢復(fù), 第 3 天以后沒(méi)有再出現(xiàn)死亡 現(xiàn) 象,中藥組在用藥后癥狀稍見(jiàn)好轉(zhuǎn),部分雞 精神萎靡,死亡現(xiàn)象一直持續(xù)到第 4 天,死亡 數(shù) 為 93 只。 統(tǒng)計(jì)兩組藥物飲水給藥后的 1 周 內(nèi) 的 治 愈 率、保 護(hù)率、死亡率各項(xiàng)指標(biāo),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均為差異顯 著(P<0.05)。 說(shuō)明雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌病的 防治效果不及新霉素。
3 結(jié)論
雪膽口服液對(duì)雞大腸桿菌自然病例的治療保 護(hù)率為 86.71%,但效果不及新霉素(95.57%)。
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