穿山龍收載于 2015 年版 《中國藥典》一部， 為薯蕷科植物穿龍薯蕷 Dioscorea nipponica Makino 的干燥根莖，于春、秋二季采挖，洗凈，除去須根 和外皮，曬干，具有祛風除濕、舒筋通絡、活血止 痛、止咳平喘等功效。江慧等優化了穿山龍 中薯蕷皂苷的酶提取工藝，然而穿龍薯蕷中甾體皂 苷的種類較多，以這些皂苷類為指標進行質量 控制時需要多個對照品，且分析條件復雜，不利于 開展日常檢測工作。

1 材料

AE240 電子分析天平 ( 萬分之一，瑞士梅特 勒-托利多公司) ; Alpha 1-2LD 冷凍干燥機 ( 德國 Christ 公司) ; HH-4 數顯恒溫水浴鍋 ( 國華電器有 限公司) ; ＲE-52A 旋轉蒸發儀 ( 上海亞榮生化儀 器廠) ; GSH-0. 5 加壓反應釜 ( 內膽 PTFE 覆膜， 威海坤昌化工有限公司) ; ＲHP-800 型高速多功能 粉碎機 ( 浙江永康榮浩工貿有限公司) ; 20AVp HPLC 系統 ( 日本島津公司) ; N2000 SP1 色譜工 作站 ( 浙江大學智達信息工程有限公司) 。薯蕷皂苷元對照品購自中國食品藥品檢定研究院 ( 批號 111539-200001) 。超純水 ( 力康生物醫療科技控股 有限公司) ; 乙腈為色譜純 ( 美國歐姆尼公司) ; 其他試劑 均 為 分 析 純 ( 國藥集團化學試劑有限公司) 。 穿山龍于 2017 年 11 月至 2018 年 4 月采自黑 龍江伊春、黑龍江尚志、吉林樺甸、吉林通化、吉 林白山、遼寧葫蘆島、陜西寶雞、河南洛陽、山東 泰安和江蘇鎮江，并經江蘇大學藥學院生藥學研究 所陳鈞教授鑒定為穿龍薯蕷 Dioscorea nipponica Makino 的根莖。藥材經冷凍干燥、粉碎后過 40 目 篩，收集細粉，置于電熱鼓風干燥箱（博迅GZX-9070MBE電熱鼓風干燥箱）中保存。

2 方法與結果

沃特世 Sunfire ＲP18柱 ( 150 mm× 4. 6 mm，5 μm) ; 流動相乙腈-水 ( 88 ∶ 12) ; 體積 流量1. 0 mL /min; 柱溫 30 ℃ ; 檢測波長 203 nm; 進樣量 20 μL; 分析時間 15 min。精 密 稱 取 薯 蕷 皂 苷 元 14. 00 mg，無水乙醇溶解并定容至 10 mL，得到質 量濃度為 1 400 μg /mL 的對照品貯備液，無水乙醇 2 倍 稀 釋，依 次 得 到 質 量 濃 度 為 700. 0、350. 0、 175. 0、97. 50、43. 75、21. 88、10. 94 μg /mL 的對 照品溶液，并用 0. 22 μm 針頭式微孔濾器過濾， 棄去初濾液，收集續濾液，即得。精密稱 取穿山龍粉末 8. 00 g，按 1 ∶ 4 比例與細沙混合并 裝填于不銹鋼色譜柱中，加入 50%乙醇 160 mL 于 80 ℃下加壓萃取 4 h，收集流出液，減壓回收至無 醇味，200 μL 濃硫酸定容至 50 mL，再加入 50 mL 石油醚 ( 90 ～ 120 ℃ ) ，于 150 ℃下加壓水解2. 0 h， 持續攪拌 ( 100 r /min) 。分取石油醚層，水洗至中 性，減壓回收溶劑至干，殘留物以無水乙醇溶解并 定容至 100 mL，用 0. 22 μm 針頭式微孔濾器濾過， 棄去初濾液，收集續濾液，即得。

3 討論與結論

在對穿山龍藥材的供試品溶液中的薯蕷皂苷元 進行分析時，比較了色譜柱 SunFire ＲP18( 150 mm× 4. 6 mm，5 μm) 、Luna C18 ( 4. 6 mm × 150 mm， 5 μm) 、 Eclipse XDB C18 ( 4. 6 mm × 150 mm， 5 μm) ，發現采用 SunFire ＲP18色譜柱時，薯蕷皂 苷元大約在 10 min 出峰，時間適中，色譜峰的對 稱性好，并且與其他成分實現了基線分離。 在以傳統技術制備穿山龍供試品溶液的過程中，常用索氏抽提法、直接酸水解法，存在耗時 長、硫酸濃度高、測定含有量偏低等不足。本研究 采用了加壓液體萃取法和加壓兩相酸水解法，在加 壓條件下，前者可以使穿山龍中的總甾體皂苷被快速、徹底地萃取出來; 后者則只需要使用低濃度硫 酸，并且水解時間大為縮短，有利于保護薯蕷皂苷 元的化學結構，從而使含有量得以提高，并有 利于環境保護，提高制備效率。



 

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